食品添加剂琥【珀酸单甘油酯

附　录　A 

检验方法

A.1　 一般规定

除非另∩有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682中规定的三级水。

试验方法中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液◥、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602和GB/T 603之规定制备。试验中所用溶液在未注█明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2　鉴别试验

A.2.1 溶解性

溶于温甲醇◣，乙醇和正丙醇。

A.2.2 脂肪酸试验

A.2.2.1　试剂⊙和材料

A.2.2.1.1　己烷。

A.2.2.1.2　氢氧化钾乙≡醇溶液：28g/L。

A.2.2.1.3　盐酸溶液：226→1000。

A.2.2.2  分析步骤

称取1g样品，与15mL氢氧化钾乙醇溶液加热回流1h。加15mL水，用约6mL盐酸溶液酸化，有油滴或白至黄白色固体产生，它可溶于5mL己烷中。分出∮己烷层，再用5mL己烷萃取一次，合并己烷》萃取液，蒸发至干。所得脂肪酸用气相色谱法鉴别，试验结果呈阳性。全部操作应在通风橱中进行。

A.2.3 琥珀●酸试验

A.2.3.1　试剂和材◤料

A.2.3.1.1　锌粉。

A.2.3.1.2　氯化铵溶液：5g/L。

A.2.3.1.3　滤纸：用含5%对二甲基氨基苯甲醛和20%三氯乙酸的苯溶液润╳湿。

A.2.3.2　分析步骤

以A.2.2.2中水层液作↘为试样溶液，取1滴试样溶液ξ，加入微量试管中，加1滴氯化铵溶液和锌粉数mg。取一片滤纸覆盖试管口。用微火焰持续加热试管底♀部约1min。视琥珀酸含量的不同，滤纸上应显现红紫色或粉红色斑点。

A.2.4 丙三醇试验

A.2.4.1　试剂和★材料

A.2.4.1.1　食品级氢氧化钙。

A.2.4.1.2　硫酸氢钾。

A.2.4.1.3　氢氧化钠『溶液：43g/L。

A.2.4.1.4　滤纸：用丙烯醛鉴别试剂（5%五氰基亚硝基高铁酸二钠水溶液和20%哌啶水溶液，临用前按1:1配制）润湿。

A.2.4.2  分析步骤

以A.2.2.2中水层液作为试①样溶液，取5mL该试样溶液，移入试管中，加过量的食品级氢氧化钙，置于沸水中5min，期间㊣振摇若干次，冷却后过滤。取该滤液1滴，放于「试管内，加约50mg硫酸氢钾。取一片滤纸覆盖试管口。用微火焰持续加热试管底部。滤纸应呈现蓝色，表明存在丙三←醇。加氢氧化钠溶液后，则转变成淡红色。

A.3　酸值的测定

A.3.1 试※剂和材料

A.3.1.1　乙醇：中性，用氢氧化钠溶液中和。

A.3.1.2　氢氧化钠标准滴定╲溶液：c（NaOH）=0.1mol/L。

A.3.1.3　酚酞指示Ψ 液：10g/L。

A.3.2 分析步骤

称取0.1g样品，精确至0.0002g，溶于50mL乙醇中，加1mL酚酞指示液，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定至微红色，保持10s不褪色〒为终点。

A.3.3 结果计算

酸值（以KOH计）w1, 数值以毫克每⊙克（mg/g）表示，按公式(A.1)计算：

              …………………………(A.1)

   式中：

V——氢氧化钠标准滴定溶液的体积的数值，单位为毫ㄨ升(mL)；

c —— 氢氧化钠标准☆滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每◣升(mol/L)；

m ——样品ㄨ质量的数值，单位为克(g)；

M ——氢氧化钾的摩尔质量的数值，单位▅为克每摩尔(g/mol) [M=56.109]。

A.4　羟值的测定

A.4.1 试剂和材⊙料

A.4.1.1　吡啶：以酚酞为指↘示剂，用盐酸溶液（1+110）中和。

A.4.1.2　中性正丁醇：以酚酞为指示剂，用氢氧化钾乙醇标准滴定溶液滴定，至∏出现粉红色且保持15s不变色。

A.4.1.3　乙酰化剂：乙酸酐与吡啶按1+3混匀，贮存于棕色瓶中。

A.4.1.4　氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液：c(KOH)=0.5mol/L。

A.4.1.5　酚酞指示液：10g/L。

A.4.2 分析步骤

称取约2g样品，精确至0.000 1g，置于250mL磨口锥形瓶中，加入5mL±0.02mL乙酰化剂，连接冷凝管，在水浴上加热回流1h。从冷凝★管上端加入10mL水于锥形瓶中，继续加热10min后，冷却至室↓温。用15mL中性正丁醇冲洗冷凝管，拆下冷凝管，再用10mL中性正丁醇冲洗瓶壁。加入8滴酚〓酞指示液↑，用氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色即为终点。同时进行空白试ζ　验。

为校正游离¤酸，称取约10g样品，精确至0.01g。置于锥形瓶中【，加入30mL吡啶，加入5滴酚酞指示液，用氢氧化钾-乙醇标准滴定溶液滴定至溶液呈粉红色。

A.4.3 结果计算

羟值以w2 计,数值以毫克每◇克（mg/g）表示，按式(A.2)计算:

         …………………………(A.2)

  式中：

V1  ——样品消耗氢氧化钾乙醇标准滴定溶液体︾积的数值,单位①为毫升(mL)；

V0 ——空白试验消耗氢氧化钾乙醇标准滴定溶液体积︽的数值,单位为毫升(mL)；

V2——校正游离酸消耗氢氧〖化钾乙醇标准滴定溶液体积的数值,单位为毫升(mL)；

c ——氢氧化钾乙醇标准滴定溶液浓度的准确数值，单¤位为摩尔每升(mol/L)；

m3 ——样品质』量的数值，单位为克(g)；

m0——校正游离酸测定时样品质量的数值，单位为克（g）；

M —— 氢氧化钾的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol) [M=56.109]。

A.5　碘值的测定

A.5.1 试剂和材料

A.5.1.1　一氯化碘。

A.5.1.2　韦氏溶液：所有物料和玻璃器皿均需干燥，取19.00g一氯化碘，溶于700mL乙酸和300mL四氯化碳配成的混合液1000mL中。如溶液不澄清，过滤。贮存于阴凉暗①处。

A.5.1.3　四氯化碳。

A.5.1.4　碘化钾溶液：100g/L。

A.5.1.5　硫代硫酸钠标准滴定溶液：0.1mol/L。

A.5.1.6　淀粉指示液：10g/L。

A.5.2 分析步骤

称取0.5g样品，精确至0.000 1g，置于碘量瓶→中，加入10mL四氯化碳，再用移液管吸入韦氏溶液25mL。摇匀。塞紧塞子，与阴凉（20～25℃）暗处放置30min。加碘化钾溶♀液15mL和水100mL。 然后在强烈摇动下用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定至黄色接近消失，加淀粉指示液1～2mL，并继续滴定至※蓝色消失为止。同时进行空白试验。

A.5.3 结果计算

碘值以w3 计, 以碘计，数值以克每百克（g/100g）表示，按式(A.3)计算:

          …………………………(A.3)

  式中：

V3——空白试验消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积的数值,单位为毫升(mL)；

V4——试验溶液消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积的数值,单位为毫升(mL)；

c ——硫代硫酸钠标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩※尔每升(mol/L)；

m ——试料质量的数值，单位为克(g)。

A.6　游离琥珀酸、结合琥珀酸的测定

A.6.1 试剂和材料

A.6.1.1　苯。

A.6.1.2　氢氧化钠甲醇标准滴定溶液：c(KOH)=0.02mol/L。溶解4g氢氧化钠于1000mL无水甲醇中，移取200mL该溶液至1000mL容量瓶中，用无水甲醇稀释并定容，摇匀。以酚酞为指示剂，琥珀酸以干基计标定ω该溶液。

A.6.1.3　酚酞指示液：10g/L。

A.6.2 分析步骤

称取约125mg样品，精确至0.000 1g，置于盛有100mL苯的250mL分液漏斗中，用温水加热分液漏斗使样品溶解，作为试样溶液。置100mL苯于另一个分液漏斗中，作为空白溶液。然后均按如下方式处理：冷却漏斗中的物质，加50mL水，翻转漏斗约20次，使之混匀。静置15min后移取→水层至125mL的锥形瓶中，向分液漏斗中加10mL水，翻转漏斗5次，将洗液倒入125mL锥形瓶中。于锥形瓶中加入5滴酚酞指示液，用氢氧化钠甲醇标准滴定溶液滴定。对空白溶液做同样处理，并记录净耗用体积，单位为mL，以V1表示。

将苯层移入500mL圆底烧瓶中，用10mL苯洗涤漏斗『。在烧瓶中加入几颗沸石，在约60℃和部分真空下蒸发苯，最好使用薄膜蒸发器，用10mL甲醇溶解烧瓶∑　中的残渣，加10mL水和5滴酚酞指示液，用氢氧化钠甲醇标准滴定溶液滴定。对空白溶液做同样处理，并记录净耗用体积，单位为mL，以V2表示。

A.6.3 结果计算

游离琥珀酸的质量分数以w4 计, 数值以%表示，按公式(A.4)计算:

          …………………………(A.4)

式中：

V1 ——试验净消耗氢氧化钠▼甲醇溶液体积的数值,单位为毫升(mL)；

c ——氢氧化钠甲醇标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每◣升(mol/L)；

m ——样品质量的数值，单位为毫克(mg)。

结合琥珀酸的质量分数以w5 计, 数值以%表示，按式(A.5)计算:

          …………………………(A.5)

式中：

V2  ——试验净消耗氢氧化钠甲醇溶液体积的数值,单位为毫升(mL)；

c ——氢氧化钠甲醇标准滴定溶液浓度的准确数值，单位为摩尔每升(mol/L)；

m ——样品质量的数值，单位为毫克(mg)。